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抑菌圈实验用具和材料、试验过程

更新时间:2021-10-18      点击次数:854
   抑菌圈常用于抗生素产生菌的分离筛选。工具菌采用抗生素的敏感菌。若被检菌能分泌某些抑制工具菌生长的物质,如抗生素等,便会在该菌落周围形成工具菌不能生长,很容易被鉴别出来。
  
  一、实验说明:
  抑菌圈法是衡量杀菌防霉剂效果的一种方式,主要用于测定杀菌防霉剂对细菌、霉菌、酵母菌的抑菌作用,是定性或半定量的方法。通过杀菌防霉剂在琼脂平板上的扩散能力来初步筛选更有效的杀菌防霉剂品种。
  
  二、用具和材料:
  霉菌培养皿,无菌吸管(或针筒),圆片滤纸(直径50px),带玻璃珠的无菌水,带过滤漏斗的三角牌,镊子,接种针(环),熔化状态的琼脂培养基(最好保温于45℃左右水浴中),一定浓度的药剂,供试验用的菌种。
  
  三、试验过程:
  1.用接种环挑取各试管斜面的菌种于带玻璃珠的无菌水中,用手振荡数分钟使孢子分散,过滤后制成混合孢子悬液。
  2.用无菌吸管(或针筒)向各培养皿中注入一定浓度的混合孢子悬浮液0.5mL。
  3.向各培养皿内注入15Ml~20ml的熔化状琼脂培养基(约45℃),将菌液与培养基混合均匀,待其冷却。
  4.用镊子将圆片滤纸在不同浓度的防霉剂中浸渍片刻,取出置于带菌培养基平板的中央,盖上盖子
  5.置适宜温度下,培养2~3d,观察滤纸片圆片周围的有无及大小。
  
  四、注意事项:
  1.所有的操作用具和材料都要事先做灭菌处理,操作必须在无菌室(或无菌箱)内于火焰旁进行。
  2.霉菌、细菌、酵母菌等各种微生物都必须分别配置混合菌液,即这里指的混合菌液是霉菌或酵母菌等诸种菌的分别混合液,并非霉菌、细菌和酵母菌的混合液。
  3.混合菌液的浓度一般为106~108cfu/mL.
  4.倒入培养皿的琼脂培养基温度不能太高(一般为45℃左右),否则会引起微生物死亡。也不能太低,因为琼脂会很快凝结,以致搅拌不均匀,影响试验结果。
  5.各种微生物的最适生长温度不同(例如霉菌一般为25~30℃,细菌一般为32~37℃等),恒温培养时宜分开放置。